Uno degli aspetti più interessanti che è emerso dallo studio del genoma umano è l’elevata identità di sequenza del DNA fra un individuo e un altro: si stima che due persone qualsiasi nel mondo condividano all’incirca il 99.9% della propria sequenza genomica.

Tuttavia, esistono delle caratteristiche della molecola di DNA che ci rendono diversi uno dall’altro, e tali caratteristiche sono definite varianti genetiche. Quando una variante è presente nella popolazione con una frequenza ≥1% è definita polimorfica, e fra queste ci sono i polimorfismi di singoli nucleotidi (Single Nucleotide Polymorphisms, SNPs), che consistono nella sostituzione di una base nucleotidica con un’altra.

Sebbene, però, molte di queste varianti siano benigne e contribuiscano alla variabilità genetica della popolazione, in alcuni casi sono causa di malattie perché possono determinare la riduzione o la perdita di funzione di una proteina.

Obiettivi Formativi

Comprensione delle cause genetiche di malattie monofattoriali e delle tecniche per individuare mutazioni causative di tali patologie.

In questa esperienza gli studenti analizzeranno una famiglia giunta alla consulenza genetica per sospetto deficit del complemento (un componente fondamentale del sistema immunitario), una malattia causata dall’assenza della proteina C8 che determina una maggiore suscettibilità alle infezioni batteriche.

Lo scopo del nostro esperimento sarà quello di ricercare la mutazione causativa della malattia in questa famiglia mediante il sequenziamento del DNA.

Descrizione dell’attività

• Reazione a catena della polimerasi (PCR) per amplificare il gene C8β;
• Visualizzazione del prodotto di PCR mediante elettroforesi su gel di agarosio;
• Sequenziamento con metodo Sanger;
• Analisi del risultato del sequenziamento sequenze.